Характеристика компонентов осиовиого вещества

2. 1. 3. Гистохимическая и ультраструктурная характеристика компонентов основного вещества. Главным фактором, определяющим гистохимические свойства протеогликанов, является

полианионный характер ГАГ, т. е. наличие большого числа отрицательно заряженных групп, расположенных по ходу линейных полимеров. На связывании полианионов с катионовыми красителями основано большинство гистохимических методик выявления ГАГ: метахромазия (изменение цвета) тиазиновых красителей, из которых обычно используются толуидиновый синий и азур А, окраска коллоидной гидроокисью железа (метод Хейла), алциановым синим, основным коричневым, сафранином О, генциановым фиолетовым, трипофлавином или акридин-оранжевым для люминесцентной микроскопии. Мы не обсуждаем здесь обширную литературу, посвященную химическим основам этих методов, а также способам контроля и дифференци-ровки различных сульфатированных и несульфатированных ГАГ. Следует лишь указать на основе собственного опыта, что гистохимический анализ ПГ требует особой тщательности и осторожности в трактовке результатов, применения одновременно нескольких методов (толуидиновый и альциановый синий, метод Хейла), ферментного контроля (тестикулярная и бактериальная гиалуронидаза, хондроитиназа), химического контроля (метилирование, окрашивание при различных рН в разной концентрации хлорида магния) и других способов, описанных в гистохимических руководствах [Виноградов В. В.
, 1971; Pearse A. L. , 1968].

Отсутствие метахромазии или других окрасок не означает, что ГАГ не содержится в неокрашенных структурах, так как биохимическими методами они, как правило, выявляются в соединительной ткани. Причиной несоответствия может служить слишком низкая для гистохимических методов концентрация этих веществ или (чаще) блокада их реакционноспособных групп белками, с которыми они связываются в протеин-поли-сахаридных комплексах. В специально проведенном нами исследовании обработка протеазами — трипсином, химотрипсином, папаином —в небольшой концентрации приводила к появлению или усилению метахромазии и окраски альциановым синим основного вещества в пленочных препаратах соединительной ткани [Шехтер А. Б. , 1964, 1966]. Подобный эффект, вероятно, объясняется частичным протеолизом белков и диссоциацией белково-полисахаридных комплексов с деблокированием реакционных групп ГАГ.

Значительные успехи в изучении распределения протеогликанов в соединительной ткани и их взаимоотношений с клеточ-

G—1252

.

Часть 1 Часть 2 Часть 3

 

Комментарий:
Автор Amadeus:
Человек человеку бог.
Автор Amadeus:
Человек человеку бог.
Автор Elena:
Плакать - не всегда значит страдать.

Ваше имя:

Комментарий: